無(wú)菌室在消毒處理后，無(wú)菌試驗(yàn)前及操作過(guò)程中需檢查空氣中菌落數(shù)，以此來(lái)判斷無(wú)菌室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度，常用沉降菌法。一般無(wú)菌室的空間潔凈度要求達(dá)到10000級(jí)，萬(wàn)級(jí)潔凈度對(duì)空間菌落的要求是：靜態(tài)檢測(cè)，自然沉降菌CFU/皿；操作區(qū)域如超凈工作臺(tái)、生物安全柜里需要達(dá)到潔凈度100級(jí)，百級(jí)潔凈度對(duì)空間菌落的要求是：靜態(tài)檢測(cè)，自然沉降菌CFU/皿。

一、沉降菌檢測(cè)方法

以無(wú)菌方式將3個(gè)營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板帶入無(wú)菌操作室，在操作區(qū)臺(tái)面左、中、右各放1個(gè)；打開(kāi)平板蓋，在空氣中暴露30min后將平板蓋好，置36℃士1℃培養(yǎng)48h，取出計(jì)數(shù)。

二、無(wú)菌室的滅菌方式

1、紫外線照射

紫外線滅菌是利用適當(dāng)波長(zhǎng)的紫外線破壞微生物機(jī)體細(xì)胞中的DNA或RNA結(jié)構(gòu)，造成生長(zhǎng)性細(xì)胞死亡來(lái)達(dá)到滅菌效果，屬于一種物理方式的滅菌。該方法可以殺滅各種微生物，包括細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體及支原體等，是實(shí)驗(yàn)室中最常用的滅菌方式。根據(jù)2002年國(guó)家衛(wèi)生部發(fā)布的《消毒技術(shù)規(guī)范》，紫外燈的要求是紫外強(qiáng)度不得低于70uW/c㎡（紫外燈1m處），空間內(nèi)的紫外燈布局要求每㎡不少于1.5W。并做到定期（至少每年1次）更換新的紫外燈管，以確保紫外燈管滅菌持續(xù)有效。

2、臭氧滅菌

臭氧是一種強(qiáng)氧化劑，通過(guò)氧化分解細(xì)菌內(nèi)部葡萄糖所需的酶，使細(xì)菌滅活死亡。使用臭氧滅菌，殺菌徹底，無(wú)殘留，殺菌廣譜，可殺滅細(xì)菌繁殖體和芽孢、病毒、真菌等，并可破壞肉毒桿菌病毒。另外，臭氧對(duì)霉菌有極強(qiáng)的殺滅作用。用臭氧消毒空氣，必須是在封閉空間，且室內(nèi)無(wú)人條件下進(jìn)行，消毒后至少30min才能進(jìn)入。一般滅菌時(shí)間選擇30min即可，要求空間中臭氧濃度不低于20mg/m3。

3、化學(xué)熏蒸

采用易揮發(fā)氣化的化學(xué)物質(zhì)的蒸汽，對(duì)空間微生物進(jìn)行殺滅的目的，常用甲醛、過(guò)氧化氫、過(guò)氧乙酸等。其中過(guò)氧化氫分解產(chǎn)物為水和氧氣，擁有無(wú)殘留的特性因此采用此方法的方案較多。其他的化學(xué)熏蒸方法的缺點(diǎn)是易殘留，對(duì)人體有一定傷害。每次熏蒸后，至少需要通風(fēng)24h才可以使用。有需要的朋友可了解一下#美卓過(guò)氧化氫消毒機(jī)#

最后，無(wú)菌室作為微生物檢測(cè)的空間，每一個(gè)質(zhì)檢員都要了解它的狀態(tài)，才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度。